Multienzyme Isothermal Rapid Amplification(MIRAmp)(RPA) Kits & MIRA Technology
Multienzyme Isothermal Rapid Amplification(MIRAmp)(RPA) Kits & MIRA Technology

Visible and rapid detection of feline chaphamaparvovirus using multienzyme isothermal rapid amplification and lateral flow dipstick(MIRA-LFD) assay

논문
MIRAmp DNA NFO kit
Nucleic Acid Detection Test Strip

고양이 장염 관련 신종 파보바이러스(FeChPV) 현장 진단법 개발에 대한 상세 설명

제목: 고양이 장염 관련 신종 파보바이러스(Feline chaphamaparvovirus, FeChPV)의 현장 진단을 위한 다중 효소 등온 증폭 및 측방 유동 면역진단법(MIRA-LFD) 개발

배경:

  • 2019년 캐나다 고양이와 2020년 중국 개의 설사 환자에서 새롭게 발견된 파보바이러스인 고양이 장염 관련 신종 파보바이러스(FeChPV)에 대한 연구입니다.
  • 기존에는 정밀한 실험 장비가 필요하거나 복잡한 과정을 거쳐야 FeChPV 감염 여부를 확인할 수 있었습니다.

연구 목표:

  • 본 연구에서는 동물병원과 같이 현장에서 쉽고 빠르게 FeChPV 감염 여부를 진단할 수 있는 방법을 개발하는 것을 목표로 했습니다.

새로운 진단 방법: MIRA-LFD (Multienzyme Isothermal Rapid Amplification and Lateral Flow Dipstick) 분석법

  • 연구진은 FeChPV 유전체의 보존된 영역을 표적으로 하는 프라이머와 프로브를 설계했습니다.
  • 이를 이용하여 다중 효소 등온 증폭(MIRA) 반응과 측방 유동 면역진단(LFD) 방식을 결합한 MIRA-LFD 분석법을 개발했습니다.
  • MIRA-LFD 분석법은 최적의 반응 온도와 시간을 결정하여 효율적인 진단을 가능하게 했습니다.

MIRA-LFD 분석법의 장점:

  • 간편성: 정밀한 실험 장비 없이도 FeChPV 감염 여부를 확인할 수 있습니다.
  • 신속성: 검사 과정이 약 20분 이내에 완료됩니다.
  • 편의성: 37°C의 비교적 낮은 온도에서 반응이 진행됩니다.
  • 정확성: 다른 바이러스와의 교차 반응이 없는 것으로 확인되었습니다.

기존 진단법과의 비교:

  • 새로 개발된 MIRA-LFD 분석법의 검출 한계는 32.3 copies/μL로, 기존의 중첩 중합효소 연쇄 반응(nested PCR) 분석법보다 약 10배 더 민감한 것으로 나타났습니다. 이는 MIRA-LFD 분석법이 더 적은 양의 바이러스로도 감염 여부를 정확하게 진단할 수 있다는 의미입니다.

현장 적용 결과:

  • 설사 증상을 보이는 417마리의 고양이 샘플을 대상으로 MIRA-LFD 분석법을 적용한 결과, 29마리에서 FeChPV 양성 반응이 나타났습니다.
  • 이는 기존의 nested PCR 분석법으로 확인된 양성률보다 약간 높은 수치입니다.

결론 및 의의:

  • 본 연구를 통해 개발된 MIRA-LFD 분석법은 FeChPV 감염 여부를 효율적이고 경제적이며 신뢰성 있고 간편하게 진단할 수 있는 방법입니다.
  • 이러한 장점들을 바탕으로 MIRA-LFD 분석법은 FeChPV 감염의 조기 예방 및 통제에 크게 기여할 수 있을 것으로 기대됩니다. 즉, 동물병원 등 현장에서 빠르고 정확하게 FeChPV 감염을 진단하여 확산을 막고 적절한 치료를 가능하게 할 수 있습니다.