Multienzyme Isothermal Rapid Amplification(MIRAmp)(RPA) Kits & MIRA Technology
Multienzyme Isothermal Rapid Amplification(MIRAmp)(RPA) Kits & MIRA Technology

Development of a single-tube RPA/CRISPR-cas12a detection platform for monkeypox virus

논 문
MIRA RPA Kits
Milenia HybriDetect 2T
LbaCas12a Protein

freeze-dried spheres of RPA and CRISPR/Cas12a reagents, which only requires adding water for reconstitution.
동결건조 서비스 문의

새로운 원숭이두창 진단 시스템 개발 연구 상세 설명

제공해주신 내용은 최근 발생한 전 세계적인 원숭이두창(Monkeypox) 유행에 대응하기 위해 개발된 새로운 진단 방법에 대한 연구 초록입니다. 이 연구는 기존의 진단 방법의 한계를 극복하고, 현장에서 쉽고 빠르게 원숭이두창을 진단할 수 있는 시스템을 개발하는 데 초점을 맞추고 있습니다. 각 부분을 자세히 설명해 드리겠습니다.

1. 서론: 원숭이두창의 심각성과 진단법의 필요성

  • 원숭이두창의 특징: 원숭이두창은 원숭이두창 바이러스(MPXV)에 의해 발생하는 인수공통 감염병으로, 주로 서아프리카와 중앙아프리카 지역에서 발생합니다.
  • 최근 전 세계적 유행의 중요성: 최근의 전 세계적인 원숭이두창 유행은 이 질병에 대한 효과적인 진단 방법의 필요성을 긴급하게 부각시켰습니다.
  • 기존 진단법의 한계: 현재 원숭이두창 진단의 표준 방법(Gold Standard)은 실시간 중합효소 연쇄 반응(qPCR)입니다. 하지만 qPCR은 전문 인력과 고가의 장비가 필요하다는 단점이 있어 현장 진단(Point-of-Care Testing, POCT)에는 어려움이 있습니다.

2. 새로운 진단 시스템 개발: CRISPR-Cas12a 기반 검출법

  • 새로운 방법의 핵심: 이 연구에서는 CRISPR-Cas12a 시스템을 기반으로 하는 새로운 원숭이두창 바이러스 검출 시스템을 개발했습니다.
  • 타겟 유전자: 이 시스템은 원숭이두창 바이러스의 A27L 유전자를 특이적으로 표적으로 합니다.
  • 높은 민감도: 개발된 시스템은 매우 낮은 농도인 10 아토몰(aM)까지 원숭이두창 바이러스를 검출할 수 있을 정도로 높은 민감도를 보입니다.
  • 높은 특이성: 이 시스템은 다른 오르토폭스바이러스(Orthopoxvirus)와 교차 반응을 보이지 않아 원숭이두창 바이러스만을 정확하게 검출할 수 있는 높은 특이성을 가지고 있습니다.
  • 빠른 검사 시간: 검사 결과를 40분 이내에 확인할 수 있어 신속한 진단이 가능합니다.

3. 현장 진단(POCT) 지원: 측면 흐름 분석법(LFA) 스트립 개발

  • 결과 시각화: 개발된 진단 시스템의 결과를 쉽고 빠르게 시각적으로 확인할 수 있도록 측면 흐름 분석법(Lateral Flow Assay, LFA) 스트립을 개발했습니다.
  • 현장 사용 편의성: LFA 스트립은 별도의 복잡한 장비 없이 현장에서 바로 결과를 확인할 수 있어 현장 진단(POCT)에 매우 유용합니다.

4. 임상 검체 검증: 다양한 검체 유형 및 qPCR 결과와의 비교

  • 다양한 임상 검체 활용: 개발된 진단 시스템은 6가지 다른 유형의 임상 검체(환자의 실제 샘플)를 사용하여 검증되었습니다.
  • 최적 검체 유형: 연구 결과, 헤르페스 수포액(herpes fluid)과 타액(saliva)이 원숭이두창 바이러스 검출에 가장 적합한 검체 유형인 것으로 나타났습니다.
  • 기존 방법과의 일치성: 개발된 시스템의 검사 결과는 기존의 표준 진단 방법인 qPCR 결과와 일치하는 것으로 확인되어 신뢰성을 입증했습니다.

5. 현장 배포 용이성 확보: 시약 동결 건조

  • 시약 안정성 확보: 개발된 진단 시스템의 핵심 시약인 RPA(Recombinase Polymerase Amplification) 및 CRISPR 관련 시약을 동결 건조(lyophilization)하여 안정성을 높였습니다.
  • 운송, 보관, 현장 배포 용이성 증대: 시약을 동결 건조함으로써 운송과 보관이 용이해지고, 냉장 보관 시설이 부족한 현장에서도 쉽게 사용할 수 있도록 했습니다.

6. 결론: 원숭이두창 조기 진단 및 방역에 기여

  • 신뢰할 수 있는 분자 진단법 제시: 이 연구는 원숭이두창의 조기 진단 및 현장 진단을 위한 신뢰할 수 있는 분자 진단 방법을 제시합니다.
  • 전염병 예방 및 통제 기여: 개발된 시스템은 빠르고 정확한 진단을 통해 원숭이두창 유행의 예방과 통제에 크게 기여할 수 있을 것으로 기대됩니다.

요약하자면, 이 연구는 기존 원숭이두창 진단법의 한계를 극복하고, CRISPR-Cas12a 기술과 측면 흐름 분석법을 융합하여 높은 민감도, 특이성, 신속성을 갖춘 현장 진단 시스템을 개발한 것입니다. 다양한 임상 검체를 통해 유효성을 확인했으며, 시약의 동결 건조를 통해 현장 적용 가능성을 높였습니다. 이는 향후 원숭이두창과 같은 신종 감염병의 발생 시 신속하고 효과적인 대응에 중요한 역할을 할 수 있을 것으로 평가됩니다.